The research on mitochondrial funct

The research on mitochondrial functions in adipocytes has increasingly evidenced that mitochondria plays an important role in the onset and/or progression of obesity and related pathologies. Mitochondrial function in brown adipose tissue (BAT) has been classically assessed by measuring either the levels/activity of mitochondrial enzymes, or the respiration in isolated mitochondria. Isolation of mitochondria is not advantageous because it demands significant time and amount of tissue and, as tissue homogenates, disrupts biochemical and physical connections of mitochondria within the cell. Here, we described a new and efficient protocol to analyze the mitochondrial respiratory states in BAT biopsies that relies on intracellular triglyceride depletion followed by tissue permeabilization. In addition to minimizing tissue requirements to ∼17 mg wet weight, the proposed protocol enabled analysis of all mitochondrial respiratory states, including phosphorylation (OXPHOS), no-phosphorylation (LEAK), and uncoupled (ETS) states, as well as the use of substrates for complex I, complex II, and cytochrome c; together, these features demonstrated mitochondrial integrity and validated the preparation efficacy. Therefore, the protocol described here increases the possibilities of answering physiological questions related to small BAT regions of human and animal models, which shall help to unravel the mechanisms that regulate mitochondrial function in health and disease.

النتائج (العربية) 1:

البحث عن وظائف الميتوكوندريا في adipocytes أثبت متزايد أن الميتوكوندريا دوراً هاما في ظهور و/أو تطور السمنة والأمراض ذات الصلة. وقسمت الوظيفة المتقدرية في الأنسجة الدهنية براون (BAT) تقليديا بقياس المستويات/نشاط إنزيمات الميتوكوندريا، أو التنفس في الميتوكوندريا المعزولة. عزل الميتوكوندريا ليس مفيداً لأنه يتطلب قدرا كبيرا من الوقت وكمية من الأنسجة الأنسجة هوموجيناتيس، يعطل اتصالات الكيمياء الحيوية والجسدية من الميتوكوندريا داخل الخلية. هنا، يمكننا وصف بروتوكول جديدة وفعالة لتحليل الدول التنفسية المتقدرية في خزعات بات يعتمد على استنزاف الدهون الثلاثية داخل الخلايا متبوعة permeabilization الأنسجة. بالإضافة إلى التقليل إلى أدنى حد من متطلبات الأنسجة بملغ ∼17 الوزن الرطب، البروتوكول المقترح تمكين تحليل جميع الدول التنفسية المتقدرية، بما في ذلك الفسفرة (أوكسفوس)، لا-الفسفرة (تسرب)، وأونكوبليد (ETS) الدول، فضلا عن استخدام ركائز للمجمع الأول والثاني المعقدة والسيتوكروم ج؛ معا، هذه الميزات أثبتت سلامة mitochondrial والتحقق من فعالية إعداد. ولذلك، البروتوكول الموصوفة هنا زيادة إمكانيات الرد على الفسيولوجية الأسئلة المتصلة بالصغيرة بات مناطق النماذج البشرية والحيوانية، والتي سوف تساعد على كشف الآليات التي تنظم الوظيفة المتقدرية في الصحة والمرض.

النتائج (العربية) 2:

وقد يدل هذا البحث على وظائف الميتوكوندريا في الخلايا الشحمية بشكل متزايد أن الميتوكوندريا يلعب دورا هاما في ظهور و / أو تطور السمنة والأمراض ذات الصلة. وظيفة الميتوكوندريا في الأنسجة الدهنية البنية (BAT) وقد تم تقييم كلاسيكي عن طريق قياس إما مستويات / نشاط الإنزيمات الميتوكوندريا، أو التنفس في الميتوكوندريا المعزولة. عزل الميتوكوندريا ليس مفيد لأنه يتطلب وقتا كبيرا وكمية من الأنسجة، وكما الخليط الأنسجة، ويعطل اتصالات البيوكيميائية والفيزيائية للالميتوكوندريا في الخلية. هنا، وصفنا بروتوكول جديد وفعال لتحليل دول الجهاز التنفسي الميتوكوندريا في الخزعات BAT التي تعتمد على استنزاف الدهون الثلاثية داخل الخلايا تليها permeabilization الأنسجة. بالإضافة إلى التقليل من متطلبات الأنسجة ل~17 ملغ الوزن الرطب، بروتوكول تمكين التحليل المقترح من جميع الدول الجهاز التنفسي الميتوكوندريا، بما في ذلك الفسفرة (OXPHOS)، لا الفسفرة (التسرب)، وفكت (ETS) تنص، فضلا عن استخدام ركائز لأني معقدة ومعقدة الثاني، والسيتوكروم ج. معا، وأظهرت هذه الميزات سلامة الميتوكوندريا والتأكد من صلاحيتها وفعاليتها التحضير. لذلك، وصفت بروتوكول هنا يزيد من احتمالات الإجابة على الأسئلة الفسيولوجية المتعلقة المناطق BAT صغيرة من النماذج البشرية والحيوانية، والتي يجب أن تساعد على كشف الآليات التي تنظم وظيفة الميتوكوندريا في الصحة والمرض.

النتائج (العربية) 3:

البحث عن وظائف الميتوكوندريا الميتوكوندريا في adipocytes بصورة متزايدة تدل على أن يلعب دورا مهما في ظهور أو تطور السمنة والأمراض المتصلة بها.وظيفة الميتوكوندريا في النسيج الدهني البني (الخفافيش) تم تقييمها بقياس كلاسيكي اما المستويات / النشاط الميتوكوندريا والإنزيمات، أو التنفس في الميتوكوندريا المعزولة.العزلة الميتوكوندريا لا ميزة، لأنها تتطلب الكثير من الوقت و كمية من الأنسجة، أنسجة homogenates اختلال البيوكيميائية والفيزيائية اتصالات الميتوكوندريا داخل الخلية.هنا نستطيع وصفه جديدة وفعالة بروتوكول تحليل الدول التنفسية الميتوكوندريا في بات التحليلات التي تعتمد على استنزاف الدهون داخل الخلايا ثم permeabilization الأنسجة.وبالإضافة إلى تقليل الاحتياجات من الأنسجة إلى نحو 17 ملغ من الوزن الرطب، مكﱠن البروتوكول المقترح من تحليل جميع الدول التنفسية الميتوكوندريا، بما في ذلك oxphos الفسفرة), لا الفسفرة (تسرب) مفصول (ETS) الدول، فضلا عن استخدام ركائز معقدة معقدة انا الثاني سيتوكروم ج؛ معا، وأثبتت هذه الميزات السلامة الميتوكوندريا و التحقق من إعداد الفعالية.ولذلك، فإن البروتوكول الموصوفة هنا يزيد من إمكانية الإجابة على أسئلة فسيولوجية تتعلق الخفافيش صغيرة مناطق النماذج البشرية والحيوانية، والتي سوف تساعد على كشف الآليات التي تنظم وظيفة الميتوكوندريا في الصحة والمرض.